描述:
一种新型化合物,用之室温处理培养瓶30分钟,能够使原代或传代培养细胞的粘附贴壁能力显著增加,处理
效果优于使用多聚赖氨酸和胶原蛋白,对绝大多细胞类型均有明显效果,本产品无细胞毒性,不影响后续免
疫荧光组化和酶学测定等实验,适用于各种原代细胞,如乳鼠脑神经元,易漂浮的传代细胞,如PC12和HEK293
细胞,也适用于药物处理易漂浮细胞;不仅能够明显改善细胞生长状态、增加细胞数量,还可以使细胞容易耐
受洗涤、换液、药物处理造成的脱落。对于生长在处理过的瓶皿中的细胞,使用细胞贴壁粘附剂可使细胞的转
染效率显著增加2-5倍。
用途及特征:
1. 各种原代细胞如脑神元的贴壁培养;
2. 易漂浮的传代细胞系如PC12和HEK293细胞;
3. 能够防止洗涤、换液、药物处理导致的细胞漂浮脱落问题;
4. 能够使真核细胞的转染效率增加2-5倍;
5. 无细胞毒性,不影响后续免疫荧光组化和酶学测定。
规格:1ml,200-500X浓缩液,溶于过滤除菌生理盐水。
储存:常温运输,4ºC保存1年。
使用方法:
1. 使用时,将此浓缩溶液以1:200-1:500比例稀释于灭菌纯水或生理盐水(0.9% NaCl)或PBS缓冲液中,制备成工作溶液。
注意:不同细胞对贴壁粘附剂的敏感度不同,通常粘附剂处理后的器皿培养细胞形态及生长状态均应正常,如果细胞比较
敏感,选用高浓度的细胞贴壁粘附剂会使细胞过度粘着,有可能出现细胞褶皱、伪足伸出不畅或细胞移动分散不佳等现象,
此时应将其进行高比例稀释,避免出现以上情况。
2. 加入新鲜工作液使其完全覆盖培养瓶皿表面。室温或37 ºC孵育30min,偶尔摇动。
3. 完全弃去瓶皿中的液体。可用灭菌蒸馏水或灭菌生理盐水或PBS缓冲液等洗涤瓶皿一次,但也可不洗涤而尽量甩干后直接
铺种细胞。经过处理的瓶皿可存放数天后使用。
4. 甩干瓶皿即可用于铺种细胞,增加多种原代培养细胞如神经元细胞的贴壁能力。
说明:
1. 使用本品后,某些类型的细胞如果贴壁过紧,消化时可加大胰酶用量或延长消化时间。
2. 该试剂安全,无毒性。
附表:各种瓶皿需要细胞贴壁粘附剂的量
培养皿/瓶
| 面积
cm2
| 需用Cell adherent reagent (µl)
| 稀释后的体积 (µl)
| 可处理的孔或瓶皿总数
|
96-well 培养板
| 0.3 /well
| 0.2µl
| 40µl
| 5000 孔
|
24-well 培养板
| 2 /well
| 0. 5µl
| 100µl
| 2000 孔
|
12-well 培养板
| 4 /well
| 1µl
| 200µl
| 1000 孔
|
6-well 培养板
| 10 /well
| 2.5µl
| 500µl
| 500 孔
|
35-mm 培养皿
10cm2 培养瓶
| 10 /dish or flask
| 2.5µl
| 500µl
| 500 瓶皿
|
60-mm 培养皿
25cm2 培养瓶
| 25 /dish or flask
| 5µl
| 1ml
| 200 瓶皿
|
10-cm 培养皿
75cm2 培养瓶
| 75 /dish or flask
| 10µl
| 2ml
| 100 瓶皿
|