货品编号: Beyotime.P0012AC
品牌:Beyotime/碧云天
SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Quick Preparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制SDS-PAGE胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)。
本试剂盒中把凝胶配制所需的缓冲试剂、SDS等预混合成下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X),简化了凝胶配制的步骤。下层胶缓冲液中含Tris pH8.8及适量SDS,上层胶缓冲液中含Tris pH6.8及适量SDS。
本试剂盒约可配制30-50块常规大小的PAGE胶。
包装清单:
产品编号
产品名称
包装
P0012AC-1
30% Acr-Bis (29:1)
100ml
P0012AC-2
下层胶缓冲液(4X)
70ml
P0012AC-3
上层胶缓冲液(4X)
30ml
P0012AC-4
Ammonium persulfate (过硫酸铵)
0.5g
P0012AC-5
TEMED
0.5ml
—
说明书
1份
下层胶缓冲液(4X)、上层胶缓冲液(4X)和Ammonnium persulfate (过硫酸铵)室温保存。30% Acr-Bis(29:1)和TEMED 4℃避光保存。过硫酸铵配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
注意事项:
过硫酸铵配制成10%溶液后,应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间,以防失效。
TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
温度较低时,下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)中的SDS可能析出。此时需水浴温育,并在完全溶解和混匀后使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
SDS-PAGE分离胶浓度
最佳分离范围
6%胶
50-150kD
8%胶
30-90kD
10%胶
20-80kD
12%胶
12-60kD
15%胶
10-40kD
成分
配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
6%胶
5
10
15
20
30
50
蒸馏水
2.7
5.4
8.1
10.8
16.2
27.0
30%Acr-Bis(29:1)
1.0
2.0
3.0
4.0
6.0
10.0
下层胶缓冲液(4X)
1.25
2.5
3.75
5.0
7.5
12.5
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.3
0.5
TEMED
0.004
0.008
0.012
0.016
0.024
0.04
成分
配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
8%胶
5
10
15
20
30
50
蒸馏水
2.4
4.7
7.1
9.5
14.2
23.7
30%Acr-Bis(29:1)
1.3
2.7
4.0
5.3
8.0
13.3
下层胶缓冲液(4X)
1.25
2.5
3.75
5.0
7.5
12.5
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.3
0.5
TEMED
0.003
0.006
0.009
0.012
0.018
0.03
成分
配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
10%胶
5
10
15
20
30
50
蒸馏水
2.0
4.1
6.1
8.1
12.2
20.3
30%Acr-Bis(29:1)
1.7
3.3
5.0
6.7
10.0
16.7
下层胶缓冲液(4X)
1.25
2.5
3.75
5.0
7.5
12.5
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.3
0.5
TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.012
0.02
成分
配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
12%胶
5
10
15
20
30
50
蒸馏水
1.7
3.4
5.1
6.8
10.2
17.0
30%Acr-Bis(29:1)
2.0
4.0
6.0
8.0
12.0
20.0
下层胶缓冲液(4X)
1.25
2.5
3.75
5.0
7.5
12.5
10%SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.3
0.5
TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.012
0.02
成分
配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
15%胶
5
10
15
20
30
50
蒸馏水
1.2
2.4
3.6
4.8
7.2
12.0
30%Acr-Bis(29:1)
2.5
5.0
7.5
10.0
15.0
25.0
下层胶缓冲液(4X)
1.25
2.5
3.75
5.0
7.5
12.5
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.3
0.5
TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.012
0.02
2. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶):
成分
配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升)
5%胶
2
3
4
6
8
10
蒸馏水
1.17
1.75
2.33
3.5
4.7
5.8
30%Acr-Bis(29:1)
0.33
0.5
0.67
1.0
1.3
1.7
上层胶缓冲液(4X)
0.5
0.75
1
1.5
2.0
2.5
10%过硫酸铵
0.02
0.03
0.04
0.06
0.08
0.1
TEMED
0.002
0.003
0.004
0.006
0.008
0.01